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如何正確操作可見(jiàn)分光光度計(jì)?

發(fā)布日期:2025-12-17        訪(fǎng)問(wèn)次數(shù):196

可見(jiàn)分光光度計(jì)作為一種基礎(chǔ)而重要的分析儀器,在石油化工、醫(yī)藥研發(fā)、環(huán)境監(jiān)測(cè)、材料科學(xué)及教育科研等多個(gè)領(lǐng)域發(fā)揮著關(guān)鍵作用。其原理是通過(guò)測(cè)量物質(zhì)對(duì)可見(jiàn)光(通常波長(zhǎng)范圍在360-1000 nm)的吸收特性,進(jìn)行定性或定量分析。要獲得可靠、重復(fù)性好的測(cè)試數(shù)據(jù),規(guī)范、正確的操作流程至關(guān)重要。本文將系統(tǒng)介紹可見(jiàn)分光光度計(jì)的標(biāo)準(zhǔn)操作要點(diǎn)與注意事項(xiàng)。

一、 操作前的準(zhǔn)備與校驗(yàn)

儀器的穩(wěn)定狀態(tài)是數(shù)據(jù)準(zhǔn)確的前提。開(kāi)機(jī)前,需確保工作環(huán)境清潔、無(wú)強(qiáng)振動(dòng)、避免強(qiáng)光直射,電源電壓符合儀器要求(通常為AC 100V-240V)。開(kāi)機(jī)預(yù)熱是必要步驟,一般建議預(yù)熱15-30分鐘,使鎢鹵素?zé)艄庠醇肮鈱W(xué)系統(tǒng)達(dá)到熱平衡,從而保證后續(xù)測(cè)量的穩(wěn)定性。預(yù)熱后,應(yīng)進(jìn)行基本的儀器性能核查,包括檢查透射比(%T)的零點(diǎn)(通常用遮光擋)和100%點(diǎn)(通常用空氣或參比溶液),確保儀器自檢功能正常。對(duì)于有波長(zhǎng)精度要求的測(cè)試,需定期使用標(biāo)準(zhǔn)濾光片或溶液核查波長(zhǎng)準(zhǔn)確性,一般儀器的波長(zhǎng)精度需在標(biāo)稱(chēng)范圍內(nèi)(例如±3.0nm內(nèi))。

二、 波長(zhǎng)的正確選擇與設(shè)置

波長(zhǎng)選擇是測(cè)試的核心,直接關(guān)系到分析的靈敏度和準(zhǔn)確性。應(yīng)依據(jù)待測(cè)物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)吸收曲線(xiàn)或相關(guān)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)方法中規(guī)定的特定波長(zhǎng)進(jìn)行設(shè)置。儀器波長(zhǎng)范圍需覆蓋待測(cè)波長(zhǎng),例如常見(jiàn)指標(biāo)如COD、氨氮、重金屬離子等均有其指定測(cè)試波長(zhǎng)。轉(zhuǎn)動(dòng)波長(zhǎng)選擇旋鈕或通過(guò)數(shù)字設(shè)定時(shí),應(yīng)注意其最小格值(如2nm),并確保波長(zhǎng)重復(fù)性(例如≤±1.5nm)滿(mǎn)足方法要求。

三、 比色皿的使用與參比設(shè)置

比色皿的清潔度與匹配性對(duì)結(jié)果影響顯著。必須使用干凈的比色皿,其透光面不可用手直接觸摸。對(duì)于精確定量分析,建議使用同一套匹配的比色皿。裝液時(shí),液面高度適宜,外壁需擦凈,避免留下液滴或指紋。每次測(cè)量,均需正確設(shè)置參比溶液——通常為不含待測(cè)組分的溶劑或空白溶液。將參比池放入光路,進(jìn)行100%T校準(zhǔn)(即調(diào)滿(mǎn)度),以扣除溶劑、比色皿等因素的吸光度背景,這是獲得準(zhǔn)確吸光度值(A值)的關(guān)鍵步驟。儀器的光度范圍通常覆蓋0-125%T,-0.097-1.999A,需確保樣品吸光度落在儀器的線(xiàn)性響應(yīng)區(qū)間內(nèi)。

四、 樣品的測(cè)量與數(shù)據(jù)處理

完成參比校準(zhǔn)后,放入待測(cè)樣品池進(jìn)行測(cè)量。讀取數(shù)據(jù)時(shí),注意儀器顯示的是透射比(%T)還是吸光度(A),兩者可通過(guò)儀器功能切換。在定量分析中,多采用吸光度模式。為確保結(jié)果可靠性,同一溶液建議重復(fù)測(cè)量2-3次,觀(guān)察其透射比重復(fù)性(例如≤0.7%T),取平均值以減少隨機(jī)誤差。對(duì)于需要濃度直接讀數(shù)的應(yīng)用,需先使用標(biāo)準(zhǔn)溶液建立校準(zhǔn)曲線(xiàn),并確認(rèn)其線(xiàn)性關(guān)系良好,濃度計(jì)算范圍(如0-1999C)滿(mǎn)足測(cè)試需求。測(cè)量過(guò)程中,注意儀器穩(wěn)定性指標(biāo),如亮電流與暗電流短期波動(dòng)應(yīng)控制在一定范圍(如3分鐘內(nèi)變化分別≤1%T和0.2%T)。

五、 日常維護(hù)與規(guī)范遵循

正確的維護(hù)能延長(zhǎng)儀器壽命并保障性能。定期檢查光源(鎢鹵素?zé)簦顟B(tài),及時(shí)更換老化燈泡。保持樣品室干燥清潔,防止溶液濺灑腐蝕光路。對(duì)于雜散光指標(biāo)(例如在360nm、420nm處≤1%T),應(yīng)通過(guò)定期校準(zhǔn)和維護(hù)保持在較低水平。所有操作與校準(zhǔn)記錄應(yīng)妥善保存。在具體行業(yè)應(yīng)用中,必須嚴(yán)格遵循相應(yīng)的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)(GB)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)或藥典等規(guī)定的測(cè)試方法,從樣品前處理到儀器參數(shù)設(shè)置、結(jié)果計(jì)算與報(bào)告,確保全過(guò)程規(guī)范統(tǒng)一。

綜上所述,正確操作可見(jiàn)分光光度計(jì)是一個(gè)系統(tǒng)性過(guò)程,涉及準(zhǔn)備、校準(zhǔn)、測(cè)量和維護(hù)多個(gè)環(huán)節(jié)。嚴(yán)謹(jǐn)遵循操作規(guī)程,關(guān)注儀器技術(shù)參數(shù)如波長(zhǎng)精度、透射比準(zhǔn)確度、穩(wěn)定性等與標(biāo)準(zhǔn)方法要求的契合度,是確保分析數(shù)據(jù)質(zhì)量與精度的根本。

在眾多品牌與型號(hào)中,得利特的B1150可見(jiàn)分光光度計(jì)在相關(guān)技術(shù)規(guī)格與應(yīng)用設(shè)計(jì)上,能夠滿(mǎn)足上述規(guī)范操作與行業(yè)測(cè)試的需求。該儀器采用單光束光路與衍射光柵光學(xué)系統(tǒng),波長(zhǎng)范圍覆蓋360-1000nm,并具備LED數(shù)字顯示透射比、吸光度及濃度等功能,設(shè)計(jì)兼顧了操作的便捷性與測(cè)量的基礎(chǔ)穩(wěn)定性,適用于常規(guī)實(shí)驗(yàn)室的日常分析工作。



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